血清的質(zhì)量對(duì)實(shí)驗(yàn)成敗起著關(guān)鍵性作用，但血清使用不當(dāng)也可能會(huì)導(dǎo)致血清質(zhì)量下降，造成細(xì)胞培養(yǎng)效果不理想。
AusgeneX澳洲胎牛血清很珍貴，大家在血清使用時(shí)怎樣確定血清使用濃度？
這個(gè)只能通過測(cè)試了。原則上血清添加量不要太多，通常分為5%、10%、20%幾檔。部分細(xì)胞原代提取時(shí)會(huì)使用20%血清，大部分細(xì)胞正常培養(yǎng)時(shí)會(huì)使用5%～10%的血清濃度。至于某一株細(xì)胞適應(yīng)什么樣的血清濃度，還需要根據(jù)細(xì)胞特性、實(shí)驗(yàn)?zāi)康淖鰷y(cè)試和調(diào)整。
血清使用前需要離心嗎？這個(gè)問題有以下兩種可能：
其一，因?yàn)檠迦诮夂笥?ldquo;絮狀物”析出。
如果沒有出現(xiàn)其他異常情況，或者血清只是用于細(xì)胞培養(yǎng)，那么*沒有必要離心去除。我們知道血清析出的“絮狀物”主要是血纖蛋白，其在血清中含量很高，而且高度不溶，在血清凍融過程中很容易析出，但它也是*無害的，甚至能促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。
另外，它還增強(qiáng)了AusgeneX澳洲胎牛血清的黏性，為細(xì)胞提供了額外的機(jī)械緩沖。在其析出過程中，會(huì)粘附培養(yǎng)體系中其他成分，離心去除，反而會(huì)損失營(yíng)養(yǎng)成分。
其二，實(shí)驗(yàn)要求純凈的培養(yǎng)體系。
培養(yǎng)的細(xì)胞需要進(jìn)一步鑒定，如免疫熒光、流式、共聚焦拍照等，細(xì)胞表面如果有黏性較強(qiáng)的血纖蛋白，勢(shì)必會(huì)影響效果。
那么，建議400g離心5min即可。如果需要進(jìn)行精密實(shí)驗(yàn)，如分離外泌體等，那么就需要至少100000g離心1.5h以上。
